人妻夜夜爽天天爽一区,久久精品国产亚洲不AV麻豆,激情综合色综合久久综合,男人五月天天堂在线

主營產(chǎn)品：

ELISA試劑盒、人ELISA試劑盒、大鼠ELISA試劑盒、小鼠ELISA試劑盒、生物試劑、抗體、血清、進口標準品、微生物培養(yǎng)基
服務(wù)熱線：

13636351217

聯(lián)系我們/CONTACT US

聯(lián)系人：錢經(jīng)理

電 話：13636351217

手 機：13636351217，13636351073

地 址：上海市松江臨港科技城漢橋文化科技園B座

郵 編：201615

傳 真：021-64881400

郵 箱：2881726255@qq.com

阿儀網(wǎng)商鋪：http://www.app17.com/c60514/

手機網(wǎng)站：m.shhyswkj.com

技術(shù)文章

牛組織蛋白酶（ELISA）說明書

點擊次數(shù)：15425   發(fā)布時間：2012/8/16 14:09:40

 

牛組織蛋白酶（Cath）酶聯(lián)免疫分析（ELISA）
試劑盒使用說明書
本試劑僅供研究使用目的：本試劑盒用于測定牛血清，血漿,組織及相關(guān)液體樣本中組織蛋白酶（Cath）的含量。

上海恒遠生物科技公司高品質(zhì)ELISA試劑盒供應(yīng)商，品質(zhì)卓越，價格實惠，售后完善，并提供免費代檢測服務(wù)。
 

實驗原理：
本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標本中牛組織蛋白酶（Cath）水平。用純化的牛組織蛋白酶（Cath）抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入組織蛋白酶（Cath），再與HRP標記的組織蛋白酶（Cath）抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標抗體復合物，經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成*終的黃色。顏色的深淺和樣品中的組織蛋白酶（Cath）呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標準曲線計算樣品中牛組織蛋白酶（Cath）濃度。
試劑盒組成：

試劑盒組成
48孔配置
96孔配置
保存
說明書
1份
1份
封板膜
2片（48）
2片（96）
密封袋
1個
1個
酶標包被板
1×48
1×96
2-8℃保存
標準品：450ng/L
0.5ml×1瓶
0.5ml×1瓶
2-8℃保存
標準品稀釋液
1.5ml×1瓶
1.5ml×1瓶
2-8℃保存
酶標試劑
3 ml×1瓶
6 ml×1瓶
2-8℃保存
樣品稀釋液
3 ml×1瓶
6 ml×1瓶
2-8℃保存
顯色劑A液
3 ml×1瓶
6 ml×1瓶
2-8℃保存
顯色劑B液
3 ml×1瓶
6 ml×1瓶
2-8℃保存
終止液
3ml×1瓶
6ml×1瓶
2-8℃保存
濃縮洗滌液
（20ml×20倍）×1瓶
（20ml×30倍）×1瓶
2-8℃保存

樣本處理及要求：
1. 血清：室溫血液自然凝固10-20分鐘，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清，保存過程中如出現(xiàn)沉淀，應(yīng)再次離心。
2. 血漿：應(yīng)根據(jù)標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)該再次離心。
3. 尿液：用無菌管收集，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。
4. 細胞培養(yǎng)上清：檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。檢測細胞內(nèi)的成份時，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細胞懸液，細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融，以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
5. 組織標本：切割標本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆�。標本融化后仍然保�?/span>2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。
6. 標本采集后盡早進行提取，提取按相關(guān)文獻進行，提取后應(yīng)盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗，可將標本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復凍融.
7. 不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。
操作步驟
1.        標準品的稀釋與加樣：在酶標包被板上設(shè)標準品孔10孔，在、第二孔中分別加標準品100μl，然后在、第二孔中加標準品稀釋液50μl，混勻；然后從孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分別加標準品稀釋液50μl，混勻；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉，再各取50μl分別加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分別加標準品稀釋液50ul，混勻；混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分別加標準品稀釋液50μl，混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分別加標準品稀釋液50μl，混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。（稀釋后各孔加樣量都為50μl，濃度分別為300ng/L，200ng/L ，100ng/L，50ng/L， 25ng/L）。
2.         加樣：分別設(shè)空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）、待測樣品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品*終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。
3.         溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4.         配液：將30（48T的20倍）倍濃縮洗滌液用蒸餾水30（48T的20倍）倍稀釋后備用。
5.         洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復5次，拍干。
6.         加酶：每孔加入酶標試劑50μl，空白孔除外。
7.         溫育：操作同3。
8.         洗滌：操作同5。
9.         顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.
10.     終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時藍色立轉(zhuǎn)黃色）。
11.     測定：以空白空調(diào)零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。
注意事項：
1． 試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標包被板開封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
2． 濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結(jié)果。
3． 各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對其準確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內(nèi)，如標本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。
4． 請每次測定的同時做標準曲線，做復孔。如標本中待測物質(zhì)含量過高（樣本OD值大于標準品孔孔的OD值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n倍）后再測定，計算時請*后乘以總稀釋倍數(shù)（×n×5）。
5． 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
6． 底物請避光保存。
7． 嚴格按照說明書的操作進行，試驗結(jié)果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.
8． 所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。
9． 本試劑不同批號組分不得混用。
10. 如與英文說明書有異，以英文說明書為準。
文本框: 計算：
以標準物的濃度為橫坐標，OD值為縱坐標，   
在坐標紙上繪出標準曲線，根據(jù)樣品的OD     
值由標準曲線查出相應(yīng)的濃度；再乘以稀釋      
倍數(shù)；或用標準物的濃度與OD值計算出標      
準曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD值      
代入方程式，計算出樣品濃度，再乘以稀釋      
倍數(shù)，即為樣品的實際濃度。                  
 
                                             
（此圖僅供參考）
試劑盒性能：
1.樣品線性回歸與預期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990以上。
2.批內(nèi)與批見應(yīng)分別小于9%和11%
檢測范圍：                                             
15ng/L -400ng/L                                      
                           
保存條件及有效期：
1.試劑盒保存：；2-8℃。
2．有效期：6個月

 

  上海恒遠生物科技有限公司主要經(jīng)營各種品牌檔次的ELISA試劑盒，品質(zhì)保證，售后服務(wù)完善。并提供免費代檢測。服務(wù)于高校及免疫學科研單位。技術(shù)人員更好的為您服務(wù)。
本公司的更多產(chǎn)品，請點擊公司網(wǎng)址：http://www.etsa.com.cn/

原創(chuàng)作者：上海恒遠生物技術(shù)發(fā)展有限公司

推薦產(chǎn)品

更多>>

首 頁| 公司介紹| 產(chǎn)品展示| 公司新聞| 技術(shù)文章| 聯(lián)系我們| 客戶留言

阿儀網(wǎng) 設(shè)計制作，未經(jīng)允許翻錄必究. 聯(lián)系人：錢經(jīng)理　聯(lián)系電話：13636351217 ICP備案號：滬ICP備11004148號-11 總訪問量：8701655 管理登錄

主營產(chǎn)品：ELISA試劑盒、人ELISA試劑盒、大鼠ELISA試劑盒、小鼠ELISA試劑盒、生物試劑、抗體、血清、進口標準品、微生物培養(yǎng)基

掃一掃，關(guān)注我們！