elisa試劑盒試驗(yàn)固相載體的選擇：很多物質(zhì)可作為固相載體，如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。

    包被抗體（或抗原）的選擇：將抗體（或抗原）吸附在固相載體表面時(shí)，懇求純度要好,吸附時(shí)通常懇求PH在9.0～9.6之間。

    吸附溫度，時(shí)間及其蛋白量也有一定影響,通常多選用4℃ 18～24小時(shí)。

    有些供氫體（如OPD等）有潛在的致癌作用，應(yīng)留心防護(hù)。

    其方法可所以凹孔平板、試管、珠粒等。

    如今常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。

    不管何種載體，在運(yùn)用前均可進(jìn)行選擇：用等量抗原包被，在同一試驗(yàn)條件下進(jìn)行反應(yīng)，查詢其顯色反應(yīng)是不是均一性，據(jù)此判明其吸附功能是不是出色。

    正式試驗(yàn)時(shí)，應(yīng)分別以陽性對(duì)照與陰性對(duì)照控制試驗(yàn)條件，待檢樣品應(yīng)作一式二份，以保證試驗(yàn)作用的性。

    ELISA試劑盒試驗(yàn)條件的選擇

    在ELISA中，進(jìn)行各項(xiàng)試驗(yàn)條件的選擇是很首要的，其間包括:

    有條件者應(yīng)運(yùn)用不致癌、靈敏度高的供氫體，如TMB和ABTS是如今較為滿意的供氫體。

    底物作用一段時(shí)間后，應(yīng)參與強(qiáng)酸或強(qiáng)堿以中止反應(yīng)。

    通常底物作用時(shí)間，以10-30分鐘為宜。

    底物運(yùn)用液有必要新鮮制造，尤其是H2O2在臨用前參與。

    然后再固定其它條件或采納“方陣法”（包被物、待檢樣品的參看品及酶符號(hào)抗體分別為不一樣的稀釋度）在正式試驗(yàn)系統(tǒng)里地滴定其工作濃度。

    有時(shí)本底較高，說明有非特異性反應(yīng)，可選用羊血清、兔血清或BSA等封閉。

    酶的底物及供氫體的選擇：對(duì)供氫體的選擇懇求是價(jià)廉、安全、有明顯地顯色反應(yīng)，而本身無色。

    蛋白質(zhì)包被的zui適濃度需進(jìn)行滴定：即用不一樣的蛋白質(zhì)濃度（0.1、1.0和10μg/ml等）進(jìn)行包被后，在其它試驗(yàn)條件相一起，查詢陽性標(biāo)本的OD值。

    選擇OD值大而蛋白量少的濃度。關(guān)于多數(shù)蛋白質(zhì)來說通常為1～10μg/ml。

    ELISA試劑盒試驗(yàn)酶符號(hào)抗體工作濃度的選擇：首先用直接ELISA法進(jìn)行開始效價(jià)的滴定（見酶符號(hào)抗體部份）。

原創(chuàng)作者：上海恒遠(yuǎn)生物技術(shù)發(fā)展有限公司