上海恒遠(yuǎn)秉承“信譽(yù)、質(zhì)量、品牌、誠信為本"的理念，以優(yōu)良的服務(wù)質(zhì)量和實(shí)惠的價(jià)格，
elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)前，請(qǐng)仔細(xì)閱讀中英文說明書，我們提供免費(fèi)代測(cè)，實(shí)驗(yàn)過程指導(dǎo)服務(wù)。在做ELISA實(shí)驗(yàn)的時(shí)候加入顯色底物后，標(biāo)準(zhǔn)品有顏色，但結(jié)果分析發(fā)現(xiàn)標(biāo)準(zhǔn)品點(diǎn)吸光值偏低或偏高、標(biāo)準(zhǔn)曲線無梯度等等，總結(jié)如下原因：
一、標(biāo)準(zhǔn)曲線點(diǎn)吸光值偏高，超出
儀器檢測(cè)范圍
ELISA標(biāo)準(zhǔn)曲線點(diǎn)的吸光值一般在3.0以下，若太高超出儀器檢測(cè)范圍，顯示OVER FLOW，可能原因：
1.可能原因：如OD絕對(duì)值靠譜，則顯色過度
1.解決方法：TMB顯色體系中建議根據(jù)S1，S2顏色進(jìn)行判斷，當(dāng)S1，S2深藍(lán)色，有明顯梯度，S5有淡藍(lán)色時(shí)即可終止。
2.可能原因：僅作單波長(zhǎng)檢測(cè)
2.解決方法： 由于參考波長(zhǎng)讀取非特異性檢測(cè)，如指紋、劃痕、水漬等，對(duì)結(jié)果也有影響。建議*終結(jié)果以雙波長(zhǎng)為*準(zhǔn)確。
二、標(biāo)準(zhǔn)曲線點(diǎn)吸光值偏低
ELISA標(biāo)準(zhǔn)曲線點(diǎn)的吸光值一般要在0.8以上，若小于0.8，可能的原因：
1.可能原因：粉末標(biāo)準(zhǔn)品未充分溶解
1.解決方法：粉末標(biāo)準(zhǔn)品按說明書加一定體積的液體后，輕柔混勻，室溫靜置30分鐘，充分溶解。
2.可能原因：標(biāo)準(zhǔn)品反復(fù)凍融
2.解決方法：標(biāo)準(zhǔn)品反復(fù)凍融后活性降低。
3.可能原因：孵育溫度、時(shí)間
3.解決方法： 按說明書要求孵育條件進(jìn)行孵育。
4.可能原因：顯色時(shí)間控制
4.解決方法：TMB顯色體系中建議根據(jù)S1，S2顏色進(jìn)行判斷，當(dāng)S1，S2深藍(lán)色，有明顯梯度，S5有淡藍(lán)色時(shí)即可終止。
三、標(biāo)準(zhǔn)曲線無梯度
ELISA 實(shí)驗(yàn)中標(biāo)準(zhǔn)品2倍倍比稀釋，但結(jié)果分析標(biāo)準(zhǔn)曲線沒有梯度，可能的原因：
1.可能原因： 樣品或標(biāo)準(zhǔn)品污染
1.解決方法： 避免污染
2.可能原因：錯(cuò)誤的樣品或標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋
2.解決方法： 完全按照說明書稀釋
3.可能原因： 偶聯(lián)抗體濃度過高
3.解決方法： 按照說明書調(diào)整到*佳的濃度
4.可能原因：TMB底物孵育時(shí)間過長(zhǎng)
4.解決方法： 調(diào)整到合適的孵育時(shí)間
5.可能原因： 錯(cuò)誤的孵育時(shí)間或溫度
5.解決方法：完全按照說明書
6.可能原因：孵育時(shí)未加蓋導(dǎo)致溶液揮發(fā)和污染
6.解決方法： 貼封片或加蓋
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