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四川師范大學汪老師與我司技術交流ELISA

點擊次數：14993 發(fā)布時間：2018/8/22 11:23:33

    在本月初的時候，四川師范大學汪老師在我公司訂購了兩個指標的進口elisa試劑盒，昨日汪老師來電給我公司業(yè)務員，表明出：實驗已經完畢，但是有一些相關實驗的小困擾。對這一問題，我司業(yè)務員時間為汪老師安排到了技術部人員與其交流ELISA實驗。

在這一實驗過程中，為什么必須設置復孔呢？
    其實這一問題，之前也有客戶問過的，為獲得更準確的實驗結果，強烈建議標準品及樣本進行復孔檢測，因為復孔檢測可以：
1. 計算平均值，確保實驗結果更準確；
2. 解決實驗中誤操作造成的跳孔現象；
3. 計算CV值，對實驗的操作和試劑盒的精密度進行評估。

    汪老師還特別問道：到什么時候終止進口ELISA試劑盒實驗的反應？

    我司技術人員說明出：本實驗*終需要酶催化底物顯色反應來完成，在*佳時間終止反應是ELISA實驗成功的重要因素。在HRP-TMB酶反應系統中，當濃度標準品顏色不再變深，倒數2-3個濃度標準品顏色開始有淺藍色時，便需要終止反應。上海恒遠技術人員說明出：“也可以根據濃度標準品孔在620nm的OD值來決定，OD620=0.9-0.95之間時即可終止”。

酶標儀讀數的時候必須選用雙波長是有什么原因呢？
因為：
1. 在使用酶標儀之前務必預熱10-15min，使測讀結果更穩(wěn)定；
2. ELISA實驗采用雙波長測定吸光度，可以排除單波長檢測時的測定干擾。
一般采用波長作為參照波長，在參照波長下，檢測物的吸光值*小，檢測波長和參照波長的吸光值之差可以消除非特異性吸收；因此，雙波長測定，可限度的消除指紋、雜質及不透光的物質對酶標儀讀數帶來的誤差，以保證實驗數據的準確度。

這幾個問題解決之后，汪老師再一次夸贊我公司，并預定了我公司八月份即將上市的新產品進口ELISA試劑盒，備用于九月開學實驗使用，非常感謝四川師范大學對上海恒遠的支持！

原創(chuàng)作者：上海恒遠生物技術發(fā)展有限公司

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