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BIM小課堂:ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)OD值的范圍?

點(diǎn)擊次數(shù)：15463 發(fā)布時(shí)間：2016/10/18 10:37:19

elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)OD值是optical density（光密度）的縮寫(xiě)，表示被檢測(cè)物吸收掉的光密度，是檢測(cè)方法里的專(zhuān)有名詞，檢測(cè)單位用OD值表示，1OD＝1og（1／trans），其中trans為檢測(cè)物的透光值。光通過(guò)被檢測(cè)物，前后的能量差異即是被檢測(cè)物吸收掉的能量，特定波長(zhǎng)下，同一種被檢測(cè)物的濃度與被吸收的能量成定量關(guān)系。
ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)*后步驟中OD值的范圍也是有一定講究的，不容小覷。說(shuō)到OD值范圍，我司業(yè)務(wù)員在售后問(wèn)題的處理過(guò)程中也常會(huì)有客戶(hù)咨詢(xún)其范圍是多少。其實(shí)是不一定的，我們以AβELISA為例，2以上就會(huì)偏飽和，變化不容易做出來(lái)，所以一般把model組控制在0.8-1.5，而control組的話(huà)基本跟空白差不多，不到0.1。
所以，一般情況下我們會(huì)建議先做個(gè)標(biāo)曲以及樣品的梯度稀釋?zhuān)缓筮x擇在標(biāo)曲中間位置的樣品稀釋度作為以后的參照稀釋度。
同時(shí)，也與使用的detector有關(guān)，detector有自己的檢測(cè)范圍和線(xiàn)性范圍。如果實(shí)驗(yàn)室使用的儀器，說(shuō)明書(shū)上說(shuō)檢測(cè)范圍是0~4，線(xiàn)性范圍是0~3，但我們自己的實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示的線(xiàn)性范圍是0~2OD。如果只檢測(cè)空白的沒(méi)有經(jīng)過(guò)處理的Elisa孔，大致在0左右。
HIV抗體ELISA法測(cè)定中空白OD值大于陰性對(duì)照OD值是什么原因,單波長(zhǎng)下和雙波長(zhǎng)下測(cè)定無(wú)明顯改變空白做的是試劑空白，不加酶,只加顯色劑和終止液,陰性對(duì)照是試劑盒提供的不用稀釋。450nm下測(cè)定和450/630nm下測(cè)定空白，沒(méi)明顯差別。

原創(chuàng)作者：上海恒遠(yuǎn)生物技術(shù)發(fā)展有限公司

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