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技術文章

樣本的采集及貯運操作不當會影響ELISA實驗結果

點擊次數(shù)：14790   發(fā)布時間：2016/9/1 9:22:17

   ELISA（酶聯(lián)免疫試驗）以其靈敏度較高、特異性好的特點已廣泛用于科研實驗及臨床，越來越多科研單位選擇用ELISA實驗方法完成研究課題，所以，ELISA就有較大的科研前景。實驗的步就是要準備好樣本，樣本的收集跟保存聽上去貌似很簡單，但不乏有許多客戶是因為樣本的收集跟保存沒做好而影響實驗結果。上海恒遠作為專業(yè)的elisa試劑盒廠家必須對影響ELISA實驗結果各因素有一定的認識。才能全方位為客戶提供*優(yōu)質的服務。優(yōu)質的試劑 、好的儀器和正確的操作是保證ELISA試劑盒檢測結果準確可靠的必要條件。
下面針對樣本收集跟保存兩點上海恒遠提幾個建議：
1.嚴重溶血，以HRP 為標記的ELISA 測定中，殘留在孔內的血紅蛋白具有過氧化物酶樣活性，催化底物顯色造成假陽性；
2.混有紅細胞的血清易沉淀或附著在聚乙烯孔內不易洗凈；如有細菌污染，菌體中可能含有內源性HRP，也會產(chǎn)生假陽性反應：
3.標本凝固不全 ，有時為了爭取時間快速檢測，常在血液還未開始凝固時即強行離心分離血清，使血清中仍殘留部分纖維蛋白原，在ELISA測定過程中可以形成肉眼可見的纖維蛋白塊，易造成假陽性結果；
4.采血試管洗滌不徹底 、反復使用易交叉污染：塑料試管能吸附抗原物質，樣本久置在塑料管內會使樣本內抗原含量下降造成假陰性。
   血清標本宜在新鮮時檢測，嚴重溶血標本禁用。一般說來，在 5 天內測定的血清標本可放置于4℃，標本在冰箱中保存時間過長導致血清IgG 聚合，使間接法的 試劑 本底加深。超過一周測定的需－20℃保存。凍結血清融解后，蛋白質局部濃縮，分布不均，應充分混勻并避免產(chǎn)生氣泡�；鞚峄蛴谐恋淼难鍢吮緫入x心或過濾，澄清后再檢測。反復凍融會使 抗體 效價跌落，所以測 抗體 的血清標本如需保存作多次檢測，宜少量分裝冰存；使用一次性玻璃試管或真空管采血管；并使用非抗凝標本，肝素抗凝血漿會增加OD值，可能與高濃度肝素具有強大的負電荷能吸附酶標記物不易洗脫有關；EDTA、酶抑制劑（如NaN3）可抑制ELISA系統(tǒng)中辣根過氧化物酶活性；血液標本采集后必須使其充分凝固后再分離血清，或標本采集時用帶分離膠的采血管或于采血管中加入適當?shù)拇倌齽?br />   上海恒遠源自的酶聯(lián)免疫技術，涵蓋國內外專家的經(jīng)驗與智慧。采用的技術和設備，確保品質的同時，降低成本，為更多有需要的研究人員，節(jié)省實驗經(jīng)費，保證實驗質量，為國家的科技發(fā)展多做貢獻。多家生物科研基地合作伙伴，實力團隊傾力打造專注于ELISA試劑盒的生產(chǎn)，研發(fā)，助力您的科研試驗！另：近期我司開學季促銷活動仍在繼續(xù)，如有需要，歡迎來電咨詢訂購！

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